طريقة مبتكرة لتحديد النيوانتجين باستخدام خلايا الورم الدائرية في مرضى السرطان المتقدمين

مقدمة

لقد أحدث ظهور مثبطات نقاط التفتيش المناعية ثورة في علاج السرطان، لا سيما في الميلانوما النقيلي. ومع ذلك، تظل فعاليتها محدودة في الأورام ذات الحمل الطفري المنخفض (TMB)، ويرجع ذلك أساسًا إلى عدم كفاية عرض النيوانتجين. تقدم هذه الدراسة طريقة جديدة لتحديد النيوانتجين باستخدام خلايا الورم الدائرية (CTCs) المعزولة من خلال الأفرز والقياس الخلوي، مما يوفر بديلاً واعدًا عن خزعات الورم التقليدية.

الطرق

تشمل طريقتنا عزل CTCs من خلايا الدم البيضاء أحادية النواة (PBMCs) المجمعة من 11 مريضًا في المرحلة الرابعة من السرطان واثنين من المتطوعين الأصحاء. تم إثراء CTCs عن طريق إزالة الخلايا الدموية CD45+ واختيار الخلايا CD45−Vimentin+، وتم تأكيد وجود خلايا خبيثة فيها من خلال الفحص الخلوي. تم استخراج الحمض النووي من كل من CTC والكتل الدموية الطبيعية وخضعت لتسلسل الإكسوم، مع تحديد النيوانتجين باستخدام منصة أنسر® للمعلوماتية الحيوية.

النتائج

في المرضى الذين يعانون من سرطان المعدة وسرطان الغدد اللعابية، قمنا بعزل 94,636 و 46,423 CTCs، على التوالي. كانت عوائد الحمض النووي كافية لتسلسل الإكسوم دون تكبير. حددنا 102 نيوانتجين في مريض سرطان المعدة و 108 في مريض سرطان الغدد اللعابية، بما في ذلك الإبيتوبيات عالية الرتبة من المتغيرات أحادية النوكليوتيد والطفرات الإطارية. نجحت هذه الطريقة في تحديد عدد كبير من النيوانتجين من CTCs في جميع مرضى السرطان في المرحلة الرابعة، مما يؤكد إمكانية تحديد النيوانتجين المحدد لكل مريض دون خزعات الورم.

المناقشة

تعد هذه الدراسة الأولى التي تظهر نجاح تحديد النيوانتجين باستخدام CTCs غير المعززة المعزولة بواسطة الأفرز والقياس الخلوي. توفر الطريقة بديلاً غير جراحي وقابل للتوسع لاكتشاف النيوانتجين، مما قد يلتقط تباين الورم بشكل أكثر فعالية من خزعات المواقع الفردية. تحمل هذه الطريقة وعدًا لتمكين استراتيجيات العلاج المناعي الشخصية السريعة، بما في ذلك لقاحات الببتيد، لقاحات الخلايا الشجرية، والعلاجات المعتمدة على mRNA.

التحديات والفرص

على الرغم من وعد مثبطات نقاط التفتيش المناعية، تظل معدلات استجابتها منخفضة، لا سيما في المرضى الذين يعانون من TMB منخفض. توفر النيوانتجين، وهي مستضدات محددة للورم تنتجها خلايا الورم، حلاً محتملاً. على عكس المستضدات المرتبطة بالورم، لا تخضع النيوانتجين لتحمل الخلايا التائية المركزية وقد أظهرت مناعة عالية. ومع ذلك، لا تزال هناك تحديات في تطوير علاجات ورمية شخصية على نطاق واسع، ويرجع ذلك أساسًا إلى القيود العملية والأخلاقية لخزعات الورم. تقدم CTCs، التي تطلق في مجرى الدم، بديلاً غير جراحي. بينما تم الإبلاغ عن طرق إثراء CTC عبر الأفرز والقياس الخلوي، لا تزال فائدتها في تحديد النيوانتجين غير مستكشفة. تجمع سير العمل الجديد لدينا بين عزل CTC بواسطة FACS وتسلسل الإكسوم للكشف عن النيوانتجين المحدد للورم مباشرة من الدم، مما يوفر اتجاهًا جديدًا للعلاج المناعي الشخصي.

الخاتمة

تحديد النيوأنتيجينات باستخدام CTCs المستمدة من الأفرز يوفر عدة مزايا في العلاج المناعي للسرطان. تتيح هذه الطريقة أخذ عينات من الورم بشكل غير جراحي، وتساعد في بدء استراتيجيات العلاج الشخصية بسرعة، ولها تطبيقات واسعة عبر مختلف الأساليب العلاجية. يمكن دمج العلاجات المعتمدة على النيوأنتيجينات مع مثبطات نقاط التفتيش المناعية، مما يعزز فعاليتها العلاجية. بينما تبدو واعدة، فإن دراستنا لها قيود. لا يزال يتعين التحقق بشكل شامل من مدى انعكاس CTCs للتنوع الجيني لجميع آفات الورم. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتأكيد هذه الملاحظة عبر أنواع السرطان المختلفة. بالإضافة إلى ذلك، قد يؤدي عزل CTC بواسطة الأفرز وFACS إلى إدخال شوائب وتحريف في أخذ العينات. يجب أن تستفيد الأعمال المستقبلية من تسلسل الخلايا الفردية أو استخدام لوحات علامات متعددة أثناء العزل لالتقاط تنوع CTC ونقائها بدقة أكبر عبر أنواع السرطان.

الاتجاهات المستقبلية

قد يوفر دمج تحديد النيوأنتيجينات مع أساليب الأوميكس الأخرى، مثل البروتيوميات والترانسكريبتوميات، رؤى إضافية حول بيولوجيا الورم والأهداف العلاجية. من الضروري تحسين بروتوكول الأفرز لضمان قابلية تكرار وجمع CTC على نطاق واسع للتطبيق السريري. تشمل الخطط المستقبلية إجراء دراسات أو تجارب سريرية مع مجموعات أكبر للحصول على بيانات سريرية وتقييم استجابات خلايا T ضد هذه النيوأنتيجينات. المساهمات الأصلية المقدمة في الدراسة مدرجة في المقالة/المواد التكميلية، ويمكن توجيه المزيد من الاستفسارات إلى المؤلف المقابل. ? **المصدر:** https://www.frontiersin.org/journals/immunology/articles/10.3389/fimmu.2025.1609116/full